See veebileht kasutab küpsiseid kasutaja sessiooni andmete hoidmiseks. Veebilehe kasutamisega nõustute ETISe kasutustingimustega. Loe rohkem
Olen nõus
"Personaalse uurimistoetuse järeldoktori toetus (PUTJD)" projekt PUTJD683
PUTJD683 "Melaniini kontsentreeriva hormooni vastaste terapeutiliste antikehade arendamine põletikulise soolehaiguse raviks (1.04.2017−31.03.2019)", Mart Ustav, Icosagen AS.
PUTJD683
Melaniini kontsentreeriva hormooni vastaste terapeutiliste antikehade arendamine põletikulise soolehaiguse raviks
Development of Recombinant Antibodies against the Melanin Concentrating Hormone Pathway for the treatment of Inflammatory Bowel Disease
1.04.2017
31.03.2019
Teadus- ja arendusprojekt
Personaalse uurimistoetuse järeldoktori toetus (PUTJD)
ETIS klassifikaatorAlamvaldkondCERCS klassifikaatorFrascati Manual’i klassifikaatorProtsent
3. Terviseuuringud3.1. BiomeditsiinB726 Kliiniline bioloogia 3.1. Biomeditsiin (anatoomia, tsütoloogia, füsioloogia, geneetika, farmaatsia, farmakoloogia, kliiniline keemia, kliiniline mikrobioloogia, patoloogia)100,0
AsutusRollPeriood
Icosagen ASkoordinaator01.04.2017−31.03.2019
PerioodSumma
01.04.2017−31.03.201975 800,00 EUR
75 800,00 EUR

Uurimisprojekti käigus seati eesmärgiks arendada terapeutilisi antikehi mis omaksid vōimekust neutraliseerida pōletikulist soolehaigust. Märklaudadena olid uurimisprojekti alguseks identifitseeritud melaniini kontsentreeriva hormooni retseptor - MCHR1 mis kuulub GPCR valkude klassi mille ekspresseerimine rakkudes on tihtipeale komplitseeritud. Et saavutada optimaalne vōimekus ekspresseerida GPCR klassi valke sai esmajärjekorras loodud HIV-1 gag ja Ebola VP40 viiruslaadsetel partiklitel pōhinev ekspressioonisüsteem, kus viiruslikud kapsiidivalgud interakteeruvad rakusiseselt märklaud-valkudega ning seetōttu suurenes märklaudvalkude kaasamine viiruslaadsetele partiklitele kuni 5 korda. Uurimisprojekti käigus laiendati ka vōimalike terapeutiliste märklaudade valikut ning lisaks MCHR1 valgule arendati ka antikehad klass F GPCR hulka kuuluvate membraanvalkude Frizzled-3 ja Frizzled-5 vastu. Frizzled-3 valk on näidatud olevat pōletikulise soolehaiguse korral epiteelrakkudes üle-ekspresseeritud ning Frizzled-5 alla reguleeritud. Uurimisprojekti käigus valideeriti saadud antikehade biokeemilisi ja biofüüsikalisi omadusi. Vastavates rakulistes mudelsüsteemides hinnati ka Frizzled-3 ja Frizzled-5 antikehade vōimekust blokeerida Wnt signaalirada ning identifitseeriti Wnt signaalirada blokeerivad antikehad.
The goal of the research project was to develop therapeutic antibodies that would have the properties to neutralize inflammatory bowel disease (IBD). Melanin-concentrating hormone (MCHR1) that was identified as one of the therapeutic targets against IBD is a GPCR protein for which obtaining suitable expression levels can be complicated. In order to obtain optimal capabilities to express GPCRs we first engineered a system to express membrane protein on HIV-1 gag and Ebola VP40 Virus-Like-Particles where the viral capsid scaffolding proteins interact intracellular with the C-terminal tails of target membrane proteins thereby resulting a up to 5-fold increase of membrane protein display on viral particles. During the research project we also expanded the list of potential target proteins to Frizzled-3 and Frizzled-5. Fzd-3 has been shown to be up-regulated and Fzd-5 down-regulated in case of patient samples from IBD patients. During the research project we validated the antibodies based on their biochemical and biophysical characteristics. We also evaluated the ability of Fzd3 and Fzd5 antibodies to modulate the Wnt signaling pathway in respective cell-based assays and we were able to identify antagonistic antibodies of the Wnt signalling pathway.
Uurimisprojekti käigus seati eesmärgiks arendada terapeutilisi antikehi mis omaksid vōimekust neutraliseerida pōletikulist soolehaigust. Märklaudadena olid uurimisprojekti alguseks identifitseeritud melaniini kontsentreeriva hormooni retseptor - MCHR1 mis kuulub GPCR valkude klassi mille ekspresseerimine rakkudes on tihtipeale komplitseeritud. Et saavutada optimaalne vōimekus ekspresseerida GPCR klassi valke sai esmajärjekorras loodud HIV-1 gag ja Ebola VP40 viiruslaadsetel partiklitel pōhinev ekspressioonisüsteem, kus viiruslikud kapsiidivalgud interakteeruvad rakusiseselt märklaud-valkudega ning seetōttu suurenes märklaudvalkude kaasamine viiruslaadsetele partiklitele kuni 5 korda. Uurimisprojekti käigus laiendati ka vōimalike terapeutiliste märklaudade valikut ning lisaks MCHR1 valgule arendati ka antikehad klass F GPCR hulka kuuluvate membraanvalkude Frizzled-3 ja Frizzled-5 vastu. Frizzled-3 valk on näidatud olevat pōletikulise soolehaiguse korral epiteelrakkudes üle-ekspresseeritud ning Frizzled-5 alla reguleeritud. Uurimisprojekti käigus valideeriti saadud antikehade biokeemilisi ja biofüüsikalisi omadusi. Vastavates rakulistes mudelsüsteemides hinnati ka Frizzled-3 ja Frizzled-5 antikehade vōimekust blokeerida Wnt signaalirada ning identifitseeriti Wnt signaalirada blokeerivad antikehad.