See veebileht kasutab küpsiseid kasutaja sessiooni andmete hoidmiseks. Veebilehe kasutamisega nõustute ETISe kasutustingimustega. Loe rohkem
Olen nõus
"Eesti Teadusfondi uurimistoetus (ETF)" projekt ETF7670
ETF7670 "Inimese papilloomiviiruse genoomi stabiilse episomaalse säilumise mehhanismi väljaselgitamine ja ravimiarenduseks sobilike rakuliinide konstrueerimine (1.01.2008−31.12.2011)", Mart Ustav, Tartu Ülikool, Loodus- ja tehnoloogiateaduskond, Tartu Ülikooli Tehnoloogiainstituut, Tartu Ülikool, Loodus- ja tehnoloogiateaduskond, Tartu Ülikooli Tehnoloogiainstituut, Tartu Ülikool, Loodus- ja tehnoloogiateaduskond, Tartu Ülikooli Tehnoloogiainstituut, Tartu Ülikool, Loodus- ja tehnoloogiateaduskond.
ETF7670
Inimese papilloomiviiruse genoomi stabiilse episomaalse säilumise mehhanismi väljaselgitamine ja ravimiarenduseks sobilike rakuliinide konstrueerimine
Study of the mechanism of stable episomal replication of the human papillomaviruses and construction of the human cell lines for drug screening
1.01.2008
31.12.2011
Teadus- ja arendusprojekt
Eesti Teadusfondi uurimistoetus (ETF)
ETIS klassifikaatorAlamvaldkondCERCS klassifikaatorFrascati Manual’i klassifikaatorProtsent
1. Bio- ja keskkonnateadused1.12. Bio- ja keskkonnateadustega seotud uuringud, näiteks biotehnoloogia, molekulaarbioloogia, rakubioloogia, biofüüsika, majandus- ja tehnoloogiauuringudP330 Bioenergeetika 1.5. Bioteadused (bioloogia, botaanika, bakterioloogia, mikrobioloogia, zooloogia, entomoloogia, geneetika, biokeemia, biofüüsika jt50,0
4. Loodusteadused ja tehnika4.16. Biotehnoloogia (loodusteadused ja tehnika)T490 Biotehnoloogia 2.3. Teised tehnika- ja inseneriteadused (keemiatehnika, lennundustehnika, mehaanika, metallurgia, materjaliteadus ning teised seotud erialad: puidutehnoloogia, geodeesia, tööstuskeemia, toiduainete tehnoloogia, süsteemianalüüs, metallurgia, mäendus, tekstiilitehnoloogia ja teised seotud teadused).50,0
PerioodSumma
01.01.2008−31.12.2008312 000,00 EEK (19 940,43 EUR)
01.01.2009−31.12.2009299 520,00 EEK (19 142,82 EUR)
01.01.2010−31.12.2010272 262,00 EEK (17 400,71 EUR)
01.01.2011−31.12.201117 401,20 EUR
73 885,16 EUR

HPV stabiilse replikatsiooni mehhanism ja viiruse genoomi säilumine latentselt nakatunud rakus on siiani ebaselge. Pole teada millised viiruselised ja rakulised valgud on osalised selles protsessis, samuti pole teada millised viiruse genoomi cis-järjestused on stabiilse replikatsiooni eest vastutavad. Uurimise põhieesmärgiks on välja selgitada inimese papilloomiviiruste genoomi stabiilse säilumise mehhanism latentselt nakkunud rakkudes. Uurimistöö on jaotatud etappideks ja nende spetsiifilisteks alameesmärgid on: a) identifitseerida viirusvalgud ja viiruse genoomi cis-järjestused, mis on tarvilikud ja piisavad HPV genoomi stabiilse replikatsiooni toimumiseks; b) selgitada välja segregatsiooni/jaotumise funktsiooni seotus viirusgenoomi replikatsioonist; c) identifitseerida HPV genoomi seondumine mitootilistele kromosoomidele ja viiruse ning raku valkude hõlmatus sellesse protsessi; d) teha inimese rakuliinid episomaalsete ekspressioonivektorite stabiilseks säilumiseks; e) kasutada episomaalseid vektoreid terapeutiliste märklaudade ekspressiooniks ja kõrgtihedusega suure läbilaskvusega rakuliste analüüsisüsteemide loomiseks. Meie töö põhihüpotees seisneb selles, et inimese papiloomiviiruste genoomi stabiilse replikatsiooni mehhanism erineb veise papilloomiviiruse genoomi säilumise mehhanismist ja lisaks replikatsioonivalkudele, E1 ja E2, on hõlmatud teised, siiani teadmata viiruselise ja/või rakulise päritoluga valgud, mis toimides identifitseerimata cis-järjestustel kindlustavad viiruse genoomi segregatsiooni/jaotumise tütarrakkudesse. Uurimistulemused publitseeritakse pärast uue leiutusliku iseloomuga info patenteerimist rahvusvahelistes eelretsenseeritavates ajakirjades. Loodavad stabiilsed rakuliinid ja episomaalsetel replikonidel põhinevad ekspressioonisüsteemid on sobivad terapeutiliste valkude ekspressiooniks, lisaks on need kasutatavad ravimiarenduses, näiteks HPV replikatsiooni inhibiitorite skriiningul. HPV stabiilse replikatsiooni või HPV genoomi stabiilse säilumise blokaatorid leiaksid laia rakendust meditsiinis ja omaksid kaheldamatut majanduslikku efekti. HPV nakkused inimestes on väga laialt levinud ning need nakkused madaldavad oluliselt elukvaliteeti. Lisaks võib nende nakkus viia pahaloomuliste kasvajate tekkele nagu see on tõestatud nii Eesti kui maailma vähkkasvajatesse haigestumise statistika alusel. Loodavad ekspressioonisüsteemid on kasutatavad ka teistele ravimmärklaudadele suunatud ravimite identifitseerimisel.
The mechanism of stable replication of the HPV genome as well as segregation/partitioning is unknown. Unclear are the sequences as well as viral and cellular proteins involved into these processes. The major objective of the study is to identify the mechanism of stable replication and maintenance in the proliferating cells for human papillomavirus genome. The specific goals of the proposed study are: a) To identify the proteins and viral genomic sequences necessary and sufficient for stable episomal maintenance of the viral genome; b) To reveal the dependence of the segregation/partitions function from the replication of the viral genome during the S-phase of the cell cycle; c) To identify the tethering and binding of the viral genome to mitotic chromatine, and identification of proteins directly involved into this process; d) To construct the human cell lines expressing E1 and E2 proteins from HPV11, HPV16 and HPV18 for study of the segregation/partitioning function of the viral genome, and cell lines which can be applied for production of therapeutic proteins in human cells or used for HTS screening; e) To use these cell lines and replicators for development of technology for expression of therapeutic proteins and for use in HTS assays. The main hypothesis we would like to confirm is that HPVs use different from the BPV1 set of viral and cellular trans-factors and cis-sequences for segregation/partitioning of the viral genome in infected cell during latent infection. The results of the study will be published after patenting of the new and applicable information in the peer review journals like EMBO Journal, PNAS and J. of Virology. Mechanism could be published in J.of Virology and biotechnological applications can be published in biotechnological journals of any rank depending on importance of application, like Nature Biotechnology, Gene Therapy and Human Gene Therapy. The cell lines and episomal replicons/expression vectors can be used in production of therapeutic proteins as well as be used in HTS. One of the obvious applications of such systems would be using these for screening drugs capable of blocking HPV stable replication. These substance will certainly have application in treatment of HPV infections, and will though be economically and socially important.