"Eesti Teadusfondi uurimistoetus" projekt ETF8399
ETF8399 "Autoantikehad kasvajaseoselise Thomsen-Friedenreich (TF) disahhariidi vastu: subpopulatsioonid, TF glükotoobi loomulikud kandjad ja seos tuumorprogressiooniga (1.01.2010−31.12.2013)", Oleg Kurtenkov, Tervise Arengu Instituut.
ETF8399
Autoantikehad kasvajaseoselise Thomsen-Friedenreich (TF) disahhariidi vastu: subpopulatsioonid, TF glükotoobi loomulikud kandjad ja seos tuumorprogressiooniga
Autoantibodies to tumor-associated Thomsen-Friedenreich (TF) disaccharide: antibody subpopulations, TF glycotope natural carriers, and relation to cancer progression
1.01.2010
31.12.2013
Teadus- ja arendusprojekt
Eesti Teadusfondi uurimistoetus
ETIS klassifikaatorAlamvaldkondCERCS klassifikaatorFrascati Manual’i klassifikaatorProtsent
3. Terviseuuringud3.1. BiomeditsiinB500 Immunoloogia, seroloogia, transplantoloogia3.1. Biomeditsiin (anatoomia, tsütoloogia, füsioloogia, geneetika, farmaatsia, farmakoloogia, kliiniline keemia, kliiniline mikrobioloogia, patoloogia)100,0
AsutusRollPeriood
Tervise Arengu Instituutkoordinaator01.01.2010−31.12.2013
PerioodSumma
01.01.2010−31.12.2010250 614,00 EEK (16 017,15 EUR)
01.01.2011−31.12.201116 017,60 EUR
01.01.2012−31.12.201216 017,60 EUR
01.01.2013−31.12.201316 017,60 EUR
64 069,95 EUR

Eesmärk: Tuvastada ja iseloomustada kasvajaseoselisele Thomsen-Friedenreichi antigeenile (TF) spetsiifilised IgG antikehade subpopulatsioonid. Plaanis on puhastada inimese TF spetsiifilised antikehad , uurida nende heterogeensust, afiinsust, glükosüleeritust, reaktiivsust loomulikele ja sünteetilistele TF glükokonjugaatidele ning funktsionaalseid omadusi (tsütotoksilised, proapoptootilised ja adhesiooni takistav aktiivsus); analüüsida TF antigeeni sisaldavaid immuunkomplekse; kasvaja ja terve koe immunohistokeemiline uuring. Uuritavad: erinevate kasvajatega haiged (n=250), terved isikud (n=60). Meetodid: afiinne kromatograafia; kihiline ja konkurentne ELISA loomulike ja sünteetiliste TF konjugaatidega; lektiin-ELISA; elektroforees ja immunoblotting, õhukesekihi kromatograafia; TF-kandja sisalduse analüüs immuunkompleksides; tsütotoksilisuse ja proapoptootilise aktiivsuse testid, gaasikromatograafia, mass spektromeetria, surface plasmon resonance (Biacore), kliinilis-immunoloogilised seosed ja elulemuse analüüs. Oodatavad tulemused: Loodame leida uusi andmeid loomuliku ja adaptiivse immuunsuse rollist kasvajavastases resistentsuses, töötada välja metoodika kasvajaseoselistele autoimmunogeensetele glükaanidele spetsiifiliste antikehade subpopulatsioonide määramiseks ja iseloomustamiseks, mida saaks kasutada kasvajavastase potentsiaali hindamiseks vähihaigetel, vähieelsete seisunditega ja tervetel inimestel. Saadud andmeid võib kasutada kasvajaseoseliste glükaanide vastaste antikehade struktuurist olenevate funktsioonide uurimisel, et hinnata kasvajaspetsiifiliste antikehade subpopulatsioonide kliinilist tähtsust. Pikaajaliseks eesmärgiks on anti-süsivesik immuunvastuse mõjutamine vähihaigetel eesmärgiga parandada haiguse kliinilist tagajärge. Töö tulemused on plaanis avaldada 6-7 artiklis ja kaitsta 2 doktoritööd.
Aim: The search for and characteristization of cancer-associated Thomsen-Friedenreich antigen (TF) specific IgG antibody (Ab) subpopulations. The focus will be on the following: human TF specific Abs purification, their heterogeneity, reactivity to natural and synthetic TF glycoconjugates, Ab affinity, the analysis of TF containing immune complexes, IgG glycosylation pattern, immunochemical study of tumor and normal tissues extracts, immunohistochemistry and TF antibody functional assay (cytotoxic, proapoptotic and anti-adhesion activity). Material: Patients with various tumours( n=250), healthy individuals ( n=60). Methods: affinity chromatography, direct, sandwich and competitive ELISA using natural and synthetic TF conjugates, lectin-ELISA; polyacrylamide gel electrophresis and immunoblotting; cell-based cytotoxic, proapoptotic and anti-adhesion activity tests; gas chromatography, mass spectrometry, surface plasmon resonance technology, clinicoimmunological correlations and survival analysis. Expected results: New data on the role of the innate and adaptive immunity in anti-tumor resistance; a new methodology for profiling the humoral immune response to autoimmunogenic tumor-associated glycans and for selecting antibody subpopulations to be applicable to the evaluation of the host anti-tumor potential in patients with cancer, in premalignant conditions and in healthy human population. The information can be exploited for the structural-based functional study of antibodies to tumor-related glycans to further evaluate the clinical relevance of tumor-specific antibody subpopulations. The long-term goal is to manipulate the anti-carbohydrate immune response of patients with cancer to improve clinical outcome. It is foreseen to publish the research results in international journals (6-7 articles), and defend two doctoral dissertation.